IL-20Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405034

概要

IL20RA はインターロイキン20受容体α（IL‑20Rα）をコードしており、これはI型サイトカイン受容体のサブユニットの一つです。IL20RB とヘテロ二量体を形成して、IL‑19、IL‑20、IL‑24 に対する機能的受容体を構成します。リガンドが結合すると JAK/STAT シグナル伝達が活性化され、特に STAT3 と STAT1 のリン酸化が顕著に誘導されます。これにより IL‑20 ファミリーサイトカインは、バリア機能、抗菌応答、組織リモデリングを制御する上皮細胞やケラチノサイトのプログラムと結び付けられます。IL‑20Rα を介したシグナルは、サイトカインやケモカインの発現を形作る炎症性ネットワークとも交差し、応答性のある細胞種における増殖・分化状態に影響し得ます。IL‑20 ファミリー経路の制御異常は、炎症性の皮膚表現型や、より広範な免疫介在性プロセスと関連付けられており、そのため IL20RA はサイトカイン駆動性の上皮生物学を機構的に研究する上で有用なノードとなります。

IL-20Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIL20RA遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IL20RA内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IL20RAのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-20Rαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-20Rαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IL20RA欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-20Rαの機能に不可欠なIL20RAエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IL20RAゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-20Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-20Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IL20RA遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-20Rα HDRプラスミド（h）および IL-20Rα HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIL20RAホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIL20RA標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。