Plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-1F9 (h): sc-406176
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IL-1F9 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IL-1F9, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-1F9 Antibody (Y-12): sc-80056
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-1F9 (h) | sc-406176 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
IL36G code l’interleukine‑36 gamma (IL‑1F9), une cytokine de la famille de l’IL‑1 qui agit comme une alar mine d’origine épithéliale et myéloïde, amplifiant les réponses immunitaires innées et adaptatives. Après activation protéolytique, IL‑1F9 transmet son signal via le complexe récepteur de l’IL‑36 (IL1RL2/IL1RAP), déclenchant les voies NF‑κB et MAPK et induisant l’expression de chimiokines et de médiateurs inflammatoires qui recrutent et activent les leucocytes. Cet axe contribue à l’immunité de barrière au niveau de la peau et des surfaces muqueuses et module l’inflammation associée aux Th17 par des interactions avec les programmes IL‑17/IL‑23. Une activité dérégulée d’IL36G a été impliquée dans des affections inflammatoires cutanées telles que le psoriasis, ainsi que dans des contextes plus larges d’inflammation tissulaire chronique, ce qui en fait un nœud utile pour étudier l’amplification des réseaux de cytokines et la signalisation immunitaire épithéliale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-1F9 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IL36G dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IL36G, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IL36G à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IL-1F9.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IL36G pour l'étude de la signalisation de IL-1F9, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IL36G essentiels à la fonction de IL-1F9
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IL36G pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IL-1F9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le IL-1F9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IL36G. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IL-1F9 plasmide HDR (h) et le IL-1F9 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IL36G pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IL36G définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.