IL-15Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421090

概要

Il15ra はマウスのインターロイキン15受容体α（IL-15Rα）をコードしており、IL-15 を高親和性で結合する構成要素として、隣接するリンパ球上の IL-2/15Rβ および共通γ鎖に対して IL-15 をトランス提示します。この受容体複合体はサイトカインの認識を JAK/STAT シグナル伝達に結び付け、NK細胞およびメモリー表現型 CD8+ T 細胞の増殖・生存・分化を制御する下流プログラムを支えます。IL-15Rα は、炎症反応や白血球トラフィッキングを調節することで免疫恒常性にも寄与しており、自己免疫、慢性炎症、感染、腫瘍免疫学のモデルにおいて重要な意味を持ちます。したがって Il15ra の遺伝学的改変は、抗原提示細胞と応答するリンパ球サブセット間のサイトカイン依存的クロストークを解析するうえで有用です。

IL-15Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl15ra遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il15ra内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il15raのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-15Rαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-15Rαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il15ra欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-15Rαの機能に不可欠なIl15raエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il15raゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-15Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-15Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il15ra遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-15Rα HDRプラスミド（m）および IL-15Rα HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl15raホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl15ra標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。