IGFBP5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400945-LAC

IGFBP5 (insulin-like growth factor binding protein 5) ist ein sezernierter und mit der extrazellulären Matrix assoziierter Regulator der IGF-Signalgebung, der die Bioverfügbarkeit sowie die Rezeptorbindung von IGF‑I und IGF‑II moduliert. Indem IGFBP5 den durch IGF1R gesteuerten Output der PI3K–AKT- und MAPK/ERK-Signalwege formt, beeinflusst es Zellproliferation, Überleben, Migration und Differenzierung; darüber hinaus besitzt es IGF‑unabhängige Effekte auf Zelladhäsion und Matrix-Remodelling. In menschlichen Geweben ist IGFBP5 mit mesenchymaler und Fibroblasten-Biologie, osteogenen Programmen sowie mit transkriptionellen Zuständen der Wundheilung verknüpft und überschneidet sich dabei häufig mit TGF‑β/SMAD-Signalgebung und der Organisation der extrazellulären Matrix. Eine dysregulierte IGFBP5-Expression wurde in verschiedenen fibrotischen und tumorassoziierten Mikroumgebungen beschrieben, was IGFBP5 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung kontextspezifischer Wachstumsfaktorantworten und stromalen Umbaus macht.

IGFBP5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IGFBP5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IGFBP5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IGFBP5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IGFBP5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IGFBP5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.