IGFBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421065

概要

Igfbp4は、インスリン様成長因子結合タンパク質4（IGFBP4）をコードする遺伝子である。IGFBP4は分泌型のIGF生物学的利用能の調節因子として、IGF1/IGF2とIGF受容体との相互作用を調整し、その結果として下流のPI3K–AKTおよびMAPKシグナル伝達に影響を与える。マウス組織では、IGFBP4は局所IGF活性の制御を通じて、細胞増殖・生存・分化や細胞外微小環境のシグナル伝達の形成に寄与する。IGFBP4発現の変化は、血管および間質コンパートメントにおけるリモデリングや炎症プログラム、ならびに代謝調節や腫瘍関連微小環境に関わる成長因子駆動性表現型の変化と関連づけられている。増殖促進性シグナルの文脈依存的な調節因子として、Igfbp4は発生、組織恒常性、ならびに成長因子シグナルの破綻を伴う疾患機序の研究で頻繁に解析されている。

IGFBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgfbp4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igfbp4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igfbp4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IGFBP4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IGFBP4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igfbp4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IGFBP4の機能に不可欠なIgfbp4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igfbp4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IGFBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIGFBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igfbp4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IGFBP4 HDRプラスミド（m）および IGFBP4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgfbp4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgfbp4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。