IGFBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421063

概要

Igfbp2は、インスリン様成長因子結合タンパク質2（IGFBP2）をコードします。IGFBP2は分泌性タンパク質であり、IGF-I/IGF-IIの生物学的利用能を調節することでIGF受容体シグナル伝達ならびに下流のPI3K–AKT経路やMAPK経路を微調整します。成長因子の隔離や提示を制御することにより、IGFBP2は発生や組織リモデリングの過程における細胞増殖、生存、遊走、細胞外マトリックスとの相互作用に影響を与えます。マウス系では、Igfbp2発現の変化が代謝制御、脂肪組織の生物学、神経炎症または損傷に関連した応答と関連づけられており、経路レベルの研究における有用なノードとなります。また、腫瘍化シグナルや微小環境リモデリングにおける文脈依存的な役割は、臨床的転帰を示唆することなく、がん関連モデルでの機序解析を後押しします。

IGFBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgfbp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igfbp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igfbp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IGFBP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IGFBP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igfbp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IGFBP2の機能に不可欠なIgfbp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igfbp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IGFBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIGFBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igfbp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IGFBP2 HDRプラスミド（m）および IGFBP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgfbp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgfbp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。