Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IGFBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421061
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IGFBP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IGFBP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IGFBP1 Anticorpo (H-5): sc-55474
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IGFBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421061 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Igfbp1 codifica a proteína 1 de ligação ao fator de crescimento semelhante à insulina (IGFBP1), um regulador secretado que se liga a IGF-I e IGF-II para modular sua biodisponibilidade, a interação com receptores e a sinalização a jusante. Ao moldar a atividade do eixo IGF, a IGFBP1 influencia as saídas das vias PI3K–AKT e MAPK, que governam a homeostase metabólica, a sobrevivência celular e a proliferação. Na fisiologia murina, a expressão hepática de Igfbp1 é fortemente responsiva a sinais nutricionais e hormonais, conectando a sinalização da insulina, programas gluconeogênicos e a dinâmica sistêmica de fatores de crescimento. Níveis desregulados de IGFBP1 têm sido associados a estados de estresse metabólico e a contextos alterados de sinalização de IGF relevantes para a função hepática e fenótipos relacionados à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IGFBP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Igfbp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Igfbp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Igfbp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IGFBP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Igfbp1 para a investigação da sinalização de IGFBP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Igfbp1 críticos para a função IGFBP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Igfbp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IGFBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IGFBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Igfbp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IGFBP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IGFBP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Igfbp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Igfbp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.