IGFBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421061

概要

Igfbp1は、インスリン様成長因子結合タンパク質1（IGFBP1）をコードしており、IGF-IおよびIGF-IIに結合してそれらの生物学的利用能、受容体への結合、ならびに下流シグナル伝達を調節する分泌性の制御因子です。IGF軸の活性を形作ることで、IGFBP1は代謝恒常性、細胞生存、増殖を司るPI3K–AKT経路およびMAPK経路の出力に影響します。マウスの生理においては、肝臓でのIgfbp1発現が栄養状態やホルモン性シグナルに強く応答し、インスリンシグナル、糖新生プログラム、そして全身性の増殖因子ダイナミクスを結び付けています。IGFBP1レベルの異常は、代謝ストレス状態や、肝機能および炎症関連表現型に関わるIGFシグナル伝達環境の変化と関連付けられています。

IGFBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgfbp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igfbp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igfbp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IGFBP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IGFBP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igfbp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IGFBP1の機能に不可欠なIgfbp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igfbp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IGFBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIGFBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igfbp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IGFBP1 HDRプラスミド（m）および IGFBP1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgfbp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgfbp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。