IFN-ω CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409162

概要

IFNW1はインターフェロン・オメガ（IFN-ω）をコードしており、自然抗ウイルス防御および免疫調節に寄与するI型インターフェロンのサイトカインです。IFNAR受容体複合体への結合により、IFN-ωはJAK1/TYK2依存性シグナル伝達を活性化し、STAT1/STAT2/IRF9による転写を介してインターフェロン刺激遺伝子（ISG）の発現を誘導します。これにより、抗ウイルス制限、抗原提示、炎症のトーン（程度）が形成されます。この経路はIRFやNF-κBのプログラムとも交差し、病原体認識応答の協調や獲得免疫とのクロストークを調整します。I型インターフェロンシグナルの破綻（制御不全）は、ウイルス感受性、慢性炎症、インターフェロン関連の自己免疫様表現型に関与するとされており、IFNW1はインターフェロン生物学を解析するうえで有用なノードとなります。

IFN-omega CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIFNW1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IFNW1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IFNW1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-omegaタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-omegaシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IFNW1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-omegaの機能に不可欠なIFNW1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IFNW1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-omega CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIFN-omega CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IFNW1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-omega HDRプラスミド（h）および IFN-omega HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIFNW1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIFNW1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。