Plasmide Double Nickase (m) IFN-γR2: sc-421052-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IFN-γR2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFN-γR2 Double Nickase (m) et le plasmide IFN-γR2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifngr2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IFN-γR2 | sc-421052-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IFN-γR2 | sc-421052-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifngr2 code le récepteur 2 de l’interféron‑γ murin (IFN‑γR2), une sous-unité de signalisation essentielle du complexe récepteur hétérodimérique de l’IFN‑γ, qui permet la réponse cellulaire à l’IFN‑γ. Lors de la liaison du ligand à IFNGR1/IFNGR2, les kinases JAK associées activent STAT1, induisant des programmes de gènes stimulés par l’interféron qui modèlent la présentation de l’antigène, l’activation des macrophages et les défenses antimicrobiennes intrinsèques des cellules. Cette voie coordonne l’immunité innée et adaptative, en influençant la différenciation des leucocytes et les réseaux de cytokines. Une signalisation IFN‑γ–JAK/STAT dérégulée est associée à des phénotypes inflammatoires et auto-immuns et peut modifier les interactions hôte–pathogène, faisant d’Ifngr2 un nœud clé pour la recherche en immunologie et en infectiologie.
IFN-γR2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifngr2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifngr2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifngr2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifngr2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.