Plásmido Doble Nickase (h) IFN-α/βRβ: sc-403854-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IFN-α/βRβ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFN-α/βRβ (h) y el plásmido de doble nickasa IFN-α/βRβ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IFNAR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFN-α/βRβ Anticuerpo (G-4): sc-376273
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IFN-α/βRβ | sc-403854-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IFN-α/βRβ | sc-403854-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFNAR2 codifica la subunidad beta del receptor de interferón alfa/beta, un componente esencial del complejo receptor de interferón tipo I que coopera con IFNAR1 para reconocer IFN-α/β e iniciar la señalización antiviral e inmunomoduladora. La unión del ligando activa JAK1 y TYK2, lo que conduce a la fosforilación de STAT1/STAT2 y a la formación del complejo ISGF3, que impulsa la expresión de genes estimulados por interferón, con interacciones (crosstalk) con las vías MAPK y PI3K. A través de estas cascadas, IFNAR2 ayuda a regular el reconocimiento inmunitario innato, la presentación de antígenos, el control del ciclo celular y la apoptosis en diversos tipos celulares. La señalización desregulada de IFNAR2 se ha implicado en respuestas antivirales alteradas, inflamación crónica y patología mediada por el sistema inmunitario, lo que la convierte en un blanco frecuente en estudios sobre la biología del interferón y las interacciones huésped–patógeno.
IFN-α/βRβ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IFNAR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IFNAR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IFNAR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IFNAR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.