IFN-α7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421044
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-α7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421044 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ifna7 codifica o interferão alfa-7 (IFN-α7) do rato, uma citocina de interferão do tipo I produzida principalmente em resposta a sinais de infeção viral e de deteção de ácidos nucleicos. O IFN-α7 liga-se ao complexo recetor IFNAR para ativar a fosforilação de STAT1/STAT2 dependente de JAK1/TYK2, promovendo a formação do complexo transcricional ISGF3 e a indução de genes estimulados por interferão, que modulam a imunidade inata e adaptativa. Este eixo de sinalização interseta-se com vias de recetores de reconhecimento de padrões, incluindo TLR e recetores do tipo RIG-I, influenciando a apresentação de antigénios, redes de citocinas e programas de restrição antiviral. A atividade desregulada do interferão do tipo I está implicada em fenótipos inflamatórios e autoimunes, bem como em interações imunes em tumores, tornando o Ifna7 um alvo útil para estudos mecanísticos da biologia mediada por interferão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-α7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifna7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifna7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifna7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-α7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifna7 para a investigação da sinalização de IFN-α7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifna7 críticos para a função IFN-α7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifna7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-α7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFN-α7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifna7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-α7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFN-α7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifna7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifna7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.