IFN-α5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421042
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-α5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421042 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino Ifna5 codifica o interferon‑α5 (IFN‑α5), um interferon do tipo I que coordena as defesas antivirais inatas e molda respostas imunes adaptativas subsequentes. O IFN‑α5 sinaliza por meio do complexo receptor IFNAR para ativar as vias JAK–STAT, induzindo genes estimulados por interferon que restringem a replicação viral, modulam a apresentação de antígenos e regulam programas de sobrevivência celular. Esse eixo de citocinas influencia o tom inflamatório nos tecidos e se integra à sinalização de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo as vias RIG‑I/MAVS e cGAS–STING. A sinalização desregulada de interferons do tipo I está implicada na suscetibilidade a infecções e em fenótipos inflamatórios mediados pelo sistema imune, relevantes para a autoimunidade e para os microambientes imunológicos de tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-α5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifna5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifna5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifna5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-α5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifna5 para a investigação da sinalização de IFN-α5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifna5 críticos para a função IFN-α5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifna5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-α5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFN-α5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifna5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-α5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFN-α5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifna5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifna5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.