Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFIT2 Double Nickase Plasmid (h): sc-403830-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IFIT2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IFIT2 Double-Nickase-Plasmid (h) und IFIT2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IFIT2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IFIT2: sc-390724
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IFIT2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403830-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFIT2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403830-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Interferon-induzierte Protein mit Tetratricopeptid-Wiederholungen 2 (IFIT2) ist ein durch Interferon stimuliertes Gen, das für einen zytosolischen antiviralen Effektor kodiert, der RNA-Spezies bindet und während angeborener Immunantworten Translation und RNA-Stoffwechsel moduliert. IFIT2 wird nachgeschaltet der Typ-I-Interferon-Signalgebung über JAK–STAT sowie ISGF3-gesteuerte Transkription induziert und fügt sich zusammen mit anderen Mitgliedern der IFIT-Familie in umfassendere antivirale Programme ein. Durch Interaktionen mit viralen und zellulären RNAs sowie die Regulation von Stress- und Apoptosewegen trägt IFIT2 zur Einschränkung der Virusreplikation und zur Prägung entzündlicher Outputs bei. Eine dysregulierte IFIT2-Expression wurde mit veränderten Interferon-Signaturen in Infektionen, der Krebsbiologie und immunvermittelten Erkrankungen in Verbindung gebracht, was IFIT2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Analyse der Regulation von Interferon-Signalwegen macht.
IFIT2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IFIT2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IFIT2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IFIT2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IFIT2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.