Plásmido Doble Nickase (h) IFIT1: sc-403066-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IFIT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFIT1 (h) y el plásmido de doble nickasa IFIT1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IFIT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IFIT1 | sc-403066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IFIT1 | sc-403066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteína inducida por interferón con repeticiones de tetratricopeptido 1 (IFIT1) es el producto de un gen estimulado por interferón que se une a ARN virales y celulares con caperuza y con metilación 2′-O incompleta para restringir la traducción y apoyar la defensa antiviral innata. IFIT1 actúa dentro de la señalización de interferones de tipo I/III aguas abajo de la activación de JAK–STAT, cooperando con otros miembros de la familia IFIT para discriminar entre ARN propio y no propio y modular el metabolismo del ARN y el acoplamiento al ribosoma. A través de estas actividades, IFIT1 contribuye a las interacciones hospedador–patógeno, a la regulación de programas inflamatorios y a la configuración de las respuestas celulares a las vías de detección de ácidos nucleicos. La expresión alterada de IFIT1 y la desregulación de la vía del interferón se observan con frecuencia en contextos de inflamación crónica, firmas de interferón asociadas a autoinmunidad y remodelación inmunitaria vinculada a infecciones, lo que convierte a IFIT1 en un nodo útil para estudios mecanísticos.
IFIT1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IFIT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IFIT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IFIT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IFIT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.