IFI-35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406072

概要

IFI35は、自然免疫シグナル伝達への関与や炎症関連遺伝子の発現調節を担うインターフェロン刺激性タンパク質であるIFI-35をコードしています。IFI-35はI型インターフェロン応答と関連し、免疫調節タンパク質と相互作用して、RIG-I様受容体やTLRシグナル伝達など、パターン認識受容体の活性化下流の経路に影響を及ぼすことが報告されています。こうしたネットワークを介して、IFI35は抗ウイルス防御プログラムに寄与し、サイトカイン産生、抗原提示、さらには免疫細胞の活性化状態全般にも影響し得ます。インターフェロンシグナルの破綻やIFI35発現の変化は、免疫介在性の病態や腫瘍—免疫相互作用と関連することが示されており、炎症、感染生物学、がん免疫学の研究における重要性を支持しています。

IFI-35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIFI35遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IFI35内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IFI35のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFI-35タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFI-35シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IFI35欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFI-35の機能に不可欠なIFI35エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IFI35ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFI-35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIFI-35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IFI35遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFI-35 HDRプラスミド（h）および IFI-35 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIFI35ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIFI35標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。