IER2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407175

Visão geral

A resposta imediata precoce 2 (IER2) é um gene de indução rápida, responsivo a estímulos, que integra sinais extracelulares provenientes de fatores de crescimento, sinais de estresse e estímulos mitogênicos em programas transcricionais de curta duração. A atividade de IER2 tem sido associada à regulação da migração celular, à remodelação do citoesqueleto e ao controle dependente do contexto da proliferação por meio da sinalização imediata precoce associada a MAPK/ERK e de alterações subsequentes na expressão gênica. Como efetor imediato precoce, o IER2 ajuda a moldar a reprogramação inicial das redes transcricionais, influenciando a dinâmica de adesão e o comportamento invasivo em múltiplos modelos celulares. Alterações na expressão de IER2 foram relatadas em diferentes contextos relevantes para doenças, sustentando seu uso como um nó mecanístico para estudar o acoplamento entre sinalização e transcrição na biologia do câncer e de processos relacionados à inflamação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IER2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IER2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IER2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IER2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IER2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IER2 para a investigação da sinalização de IER2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IER2 críticos para a função IER2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IER2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IER2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IER2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IER2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IER2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IER2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IER2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IER2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.