IER2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407175

概要

Immediate early response 2（IER2）は、刺激に応答して迅速に誘導される遺伝子であり、成長因子、ストレスシグナル、ならびにマイトジェン入力といった細胞外からの手がかりを、短時間で消失する転写プログラムへと統合します。IER2の活性は、MAPK/ERKに関連する即時早期シグナル伝達およびそれに続く遺伝子発現変化を介して、細胞移動、細胞骨格の再構築、さらに状況依存的な増殖制御の調節に関与することが示されています。即時早期エフェクターとしてのIER2は、複数の細胞モデルにおいて、接着ダイナミクスや浸潤性の挙動に影響する初期の転写ネットワーク再配線の形成に寄与します。IER2発現の変化は疾患関連のさまざまな状況で報告されており、がんや炎症関連生物学における「シグナル伝達から転写への結合（coupling）」を検討するための機構的ノードとしての有用性が支持されています。

IER2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIER2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IER2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IER2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IER2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IER2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IER2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IER2の機能に不可欠なIER2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IER2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IER2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIER2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IER2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IER2 HDRプラスミド（h）および IER2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIER2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIER2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。