Plasmide Double Nickase (h) HYAL1: sc-404500-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HYAL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HYAL1 Double Nickase (h) et le plasmide HYAL1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HYAL1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HYAL1 Antibody (1D10): sc-101340
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HYAL1 | sc-404500-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HYAL1 | sc-404500-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HYAL1 code l’hyaluronoglucosaminidase 1, une endoglycosidase lysosomale qui dégrade l’hyaluronane et d’autres glycosaminoglycanes afin de réguler le renouvellement de la matrice extracellulaire et l’hydratation des tissus. En contrôlant le catabolisme de l’hyaluronane, HYAL1 influence l’organisation de la matrice péricellulaire, l’adhésion et la migration cellulaires, ainsi que des sorties de signalisation liées à l’inflammation et au remodelage stromal. Une activité altérée de HYAL1 a été associée à une dégradation dérégulée de la matrice et à des phénotypes de remodelage observés en biologie du cancer, dans les processus fibrosants et dans les pathologies vasculaires. HYAL1 est donc largement étudié dans les voies qui relient le traitement lysosomal des glycannes au comportement cellulaire dépendant du microenvironnement.
HYAL1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HYAL1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HYAL1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HYAL1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HYAL1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.