Plasmide Double Nickase (h) HSPA6: sc-400870-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HSPA6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HSPA6 Double Nickase (h) et le plasmide HSPA6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HSPA6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HSPA6 Antibody (G-9): sc-374589
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HSPA6 | sc-400870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HSPA6 | sc-400870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA6 code un membre de la famille des chaperonnes HSP70 inductible par le stress, qui stabilise les protéines naissantes et endommagées et aide à rétablir la protéostasie après un stress cellulaire aigu. HSPA6 participe au repliement des protéines dépendant de l’ATP, à la prévention de l’agrégation protéique et à la récupération du protéome après un choc thermique, un stress oxydatif et des agressions protéotoxiques, en s’articulant avec des voies telles que la réponse au choc thermique, la gestion des protéines mal repliées et le contrôle qualité des protéines. En influençant la capacité de repliement et la disponibilité des chaperonnes, l’expression de HSPA6 peut moduler la susceptibilité cellulaire aux dysfonctionnements induits par le stress, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des déséquilibres de la protéostasie observés dans la neurodégénérescence, l’adaptation des cellules cancéreuses au stress et les microenvironnements inflammatoires.
HSPA6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HSPA6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HSPA6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HSPA6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HSPA6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.