Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HS3ST3A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-406545-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HS3ST3A1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HS3ST3A1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HS3ST3A1 Anticorpo (D-7): sc-377259
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HS3ST3A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-406545-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HS3ST3A1 codifica a heparan sulfato–glicosamina 3-O-sulfotransferase 3A1, uma enzima localizada no complexo de Golgi que catalisa a 3-O-sulfatação de resíduos de glicosamina durante a biossíntese de proteoglicanos de heparan sulfato. Essa modificação ajuda a definir a estrutura fina do heparan sulfato e, assim, influencia a ligação e a apresentação de ligantes extracelulares, moldando a sinalização de fatores de crescimento e morfógenos na superfície celular e na matriz extracelular. Por seu papel na maturação do heparan sulfato, a HS3ST3A1 pode impactar vias como FGF, VEGF e sinalização mediada por quimiocinas, com efeitos a jusante sobre adesão celular, migração e remodelamento tecidual. Alterações na expressão ou padrões desregulados de sulfatação do heparan sulfato têm sido associadas a processos de desenvolvimento e a fenótipos relevantes para doenças, incluindo progressão tumoral e sinalização em microambientes inflamatórios, motivando estudos mecanísticos sobre o remodelamento de glicosaminoglicanos dependente de HS3ST3A1.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HS3ST3A1 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HS3ST3A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HS3ST3A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HS3ST3A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HS3ST3A1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HS3ST3A1 para a investigação da sinalização de HS3ST3A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HS3ST3A1 críticos para a função HS3ST3A1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HS3ST3A1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HS3ST3A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HS3ST3A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HS3ST3A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HS3ST3A1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HS3ST3A1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HS3ST3A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HS3ST3A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.