Plásmido Doble Nickase (h) HoxD9: sc-404606-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxD9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxD9 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxD9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXD9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HoxD9 Anticuerpo (H-2): sc-137134
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxD9 | sc-404606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxD9 | sc-404606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD9 codifica el factor de transcripción con homeobox HoxD9, un regulador de unión al ADN dependiente de secuencia que ayuda a establecer la organización anteroposterior y la identidad posicional durante el desarrollo embrionario. Como parte de las redes reguladoras de genes HOX, HoxD9 modula programas transcripcionales que controlan la diferenciación, la morfogénesis y las decisiones de destino celular, integrándose con el control mediado por la cromatina y con vías de señalización del desarrollo. La expresión desregulada de HOXD9 y la actividad alterada de programas HOX se han asociado con cambios en la especificación de linaje y en los programas de proliferación observados en múltiples contextos de cáncer y en otros trastornos del desarrollo. Estas características hacen de HOXD9 una diana útil para estudiar la arquitectura de los circuitos transcripcionales, la lógica potenciador–promotor y los mecanismos de expresión génica aberrante del desarrollo en células humanas.
HoxD9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXD9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXD9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXD9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXD9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.