HoxC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431637

Visão geral

Hoxc10 codifica o fator de transcrição homeobox HOXC10, um regulador de ligação ao DNA específico de sequência que ajuda a estabelecer o padrão ântero-posterior e a identidade posicional durante a embriogênese. No desenvolvimento do camundongo, os programas HOX se integram a redes de sinalização conduzidas por morfógenos, como as vias WNT, FGF, ácido retinoico e BMP, para coordenar a especificação de linhagens, a formação do esqueleto axial e a diferenciação regional. Além do desenvolvimento, alterações na regulação de genes HOX são comumente associadas a redes transcricionais desreguladas que influenciam a manutenção do destino celular, a migração e a diferenciação. Assim, a perturbação de programas associados ao HOXC10 é relevante para o estudo de defeitos congênitos de padronização e de mecanismos de reprogramação transcricional implicados na biologia de doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxC10 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hoxc10 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hoxc10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hoxc10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxC10.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hoxc10 para a investigação da sinalização de HoxC10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hoxc10 críticos para a função HoxC10
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hoxc10 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HoxC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HoxC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hoxc10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxC10 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HoxC10 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hoxc10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hoxc10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.