hnRNP UL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405017

Descripción general

HNRNPUL1 codifica la ribonucleoproteína nuclear heterogénea humana UL1, un factor asociado a ARN y ADN que participa en el procesamiento del pre-ARNm y en la coordinación de la expresión génica con el mantenimiento del genoma. hnRNP UL1 se ha relacionado con programas de respuesta al daño del ADN, incluida la captación y regulación de complejos asociados a la reparación en sitios de estrés genotóxico, influyendo así en la gestión del estrés replicativo y en la reparación acoplada a la transcripción. A través de estas funciones, HNRNPUL1 afecta a la proliferación celular y a la adaptación al estrés al modular el metabolismo del ARN y los procesos de reparación asociados a la cromatina. Se han descrito alteraciones en la función o la expresión de hnRNP UL1 en contextos que implican inestabilidad genómica y un procesamiento del ARN desregulado, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos de vías asociadas a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO hnRNP UL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HNRNPUL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HNRNPUL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HNRNPUL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína hnRNP UL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HNRNPUL1 para la investigación de la señalización de hnRNP UL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HNRNPUL1 críticos para la función de hnRNP UL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HNRNPUL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido hnRNP UL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido hnRNP UL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HNRNPUL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR hnRNP UL1 (h) y el plásmido HDR hnRNP UL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HNRNPUL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HNRNPUL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.