Plasmide Double Nickase (h) hnRNP D0: sc-401911-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) hnRNP D0 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide hnRNP D0 Double Nickase (h) et le plasmide hnRNP D0 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HNRNPD. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) hnRNP D0 | sc-401911-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) hnRNP D0 | sc-401911-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPD humain code hnRNP D0 (AUF1), une protéine de liaison à l’ARN qui reconnaît des éléments riches en AU dans les 3′ UTR afin de réguler la stabilité, le renouvellement et la traduction des ARNm. hnRNP D0 participe à des réseaux de contrôle post-transcriptionnel gouvernant la signalisation inflammatoire, la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress et la différenciation, en modulant la dégradation de transcrits de cytokines et de gènes à réponse immédiate. Elle contribue également au traitement de l’ARN et à la dynamique des complexes ribonucléoprotéiques, reliant le métabolisme de l’ARN à des voies telles que l’expression génique dépendante de NF-κB et la biologie des granules de stress. Une activité dérégulée de hnRNP D0 a été associée à des programmes inflammatoires aberrants et à une expression altérée de gènes liés à la croissance et à la survie dans des contextes pertinents pour le cancer et la neurodégénérescence, ce qui soutient son étude en tant que régulateur de l’homéostasie du transcriptome.
hnRNP D0 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HNRNPD dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HNRNPD. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HNRNPD. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HNRNPD.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.