HLX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403700

概要

HLX（H2.0様ホメオボックス）遺伝子は、ホメオドメイン型転写因子HLX1をコードしており、発生過程における遺伝子発現プログラムおよび系譜特異的な分化を制御する調節因子です。HLX1は、増殖・生存・細胞運命決定を司る転写ネットワークを統合的に調節することで、造血系および免疫細胞の成熟に影響を及ぼし、サイトカイン応答性シグナル伝達とその下流の転写制御を担う経路との関連が示されています。HLXの発現異常は、血液系疾患や免疫関連疾患の病態生物学に関係する文脈で報告されており、異常分化や転写リプログラミングの機構を研究するための有用な標的となります。核内のDNA結合タンパク質として、HLX1はエンハンサー—プロモーター制御、クロマチン依存的な調節、発生関連転写因子の回路（ネットワーク）に関する研究にも利用されています。

HLX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHLX遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HLX内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HLXのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HLX1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HLX1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HLX欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HLX1の機能に不可欠なHLXエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HLXゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HLX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHLX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HLX遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HLX1 HDRプラスミド（h）および HLX1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHLXホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHLX標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。