Plasmide Double Nickase (h) Histone Deacetylase 7 (HDAC7): sc-400989-NIC

HDAC7 code pour l’histone désacétylase 7, une HDAC de classe IIa qui navette entre le noyau et le cytoplasme afin de réguler l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels de manière dépendante des signaux. HDAC7 agit au sein de complexes corépresseurs et intègre la signalisation des kinases dépendantes du calcium/de la calmoduline pour moduler l’expression génique liée à la différenciation cellulaire, à la survie, ainsi qu’à la biologie immunitaire et endothéliale. En contrôlant les états d’acétylation au niveau des régions régulatrices, HDAC7 influence des voies gouvernant l’engagement de lignée et les réponses inflammatoires, notamment les réseaux transcriptionnels associés à MEF2. Une activité et une expression dérégulées de HDAC7 ont été associées à une régulation épigénétique aberrante observée dans le cancer, ainsi que dans des pathologies cardiovasculaires et immunitaires, ce qui soutient des études mécanistiques du contrôle de l’expression génique dépendant de la chromatine.

Histone Deacetylase 7 (HDAC7) Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HDAC7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HDAC7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HDAC7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HDAC7.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.