Plasmide Double Nickase (h) Histone Deacetylase 1 (HDAC1): sc-400203-NIC

Le gène humain **HDAC1** code l’histone désacétylase 1, une désacétylase de lysine de classe I qui compacte la chromatine en retirant des groupes acétyle des queues d’histones afin de moduler les programmes transcriptionnels. HDAC1 agit au sein de complexes corépresseurs tels que Sin3, NuRD et CoREST, reliant la régulation épigénétique à la progression du cycle cellulaire, à la réplication et à la réparation de l’ADN, ainsi qu’à la différenciation. Par des interactions croisées avec des voies incluant la transcription dépendante de p53, le contrôle RB/E2F et des signalisations sensibles au stress, HDAC1 contribue au maintien de la stabilité du génome et à une expression génique coordonnée. Une activité d’HDAC1 dérégulée et des états de chromatine altérés sont fréquemment associés à une reprogrammation transcriptionnelle oncogénique et à une prolifération aberrante, faisant d’HDAC1 une cible majeure pour des études mécanistiques du contrôle épigénétique dans des contextes pertinents pour les maladies.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HDAC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HDAC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HDAC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HDAC1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.