Histone cluster 1 H1E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402775

Visão geral

HIST1H1E codifica a histona do cluster 1 H1E, uma variante da histona de ligação H1 dependente da replicação, que se liga ao DNA nucleossômico para estabilizar a estrutura da cromatina de ordem superior e influenciar a compactação do genoma. Ao modular a acessibilidade da cromatina, a H1E ajuda a regular programas transcricionais, o timing da replicação do DNA e as respostas a danos no DNA por meio de efeitos no remodelamento da cromatina e no recrutamento de fatores de reparo. Alterações na estequiometria da família H1 e na dinâmica das histonas de ligação têm sido associadas à desregulação epigenética observada no câncer e em transtornos do neurodesenvolvimento, e perturbações relacionadas a HIST1H1E podem impactar decisões de destino celular e a estabilidade genômica. Como parte do lócus do cluster de histonas 1, HIST1H1E também é relevante para estudos da expressão de histonas acoplada à fase S e da montagem da cromatina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Histone cluster 1 H1E (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HIST1H1E em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HIST1H1E, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HIST1H1E na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Histone cluster 1 H1E.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HIST1H1E para a investigação da sinalização de Histone cluster 1 H1E, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HIST1H1E críticos para a função Histone cluster 1 H1E
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HIST1H1E para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Histone cluster 1 H1E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Histone cluster 1 H1E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HIST1H1E. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Histone cluster 1 H1E Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Histone cluster 1 H1E (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HIST1H1E para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HIST1H1E definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.