Plásmido Doble Nickase (h) Histamine H4 Receptor: sc-402430-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histamine H4 Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histamine H4 Receptor (h) y el plásmido de doble nickasa Histamine H4 Receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HRH4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histamine H4 Receptor | sc-402430-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH4 codifica el receptor H4 de histamina (H4R), un receptor acoplado a proteína G de clase A predominantemente asociado a Gi/o, que modula la quimiotaxis de células inmunitarias, la liberación de citocinas y el tono inflamatorio en respuesta a la histamina. La activación del receptor influye en la señalización de segundos mensajeros, como la reducción de AMPc, la movilización de calcio y la actividad posterior de la vía MAPK/ERK, dando forma al tráfico y a los programas de activación de los leucocitos. La expresión de HRH4 en linajes hematopoyéticos vincula este receptor con la regulación de la inflamación alérgica y con procesos inmunomediados más amplios, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de redes de señalización inflamatoria. La desregulación de la señalización histamina–H4R se ha asociado con fenotipos inflamatorios y pruriginosos en contextos de investigación preclínica y traslacional, lo que respalda su uso como nodo funcional en el análisis de vías de la inmunología.
Histamine H4 Receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HRH4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HRH4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HRH4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HRH4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.