Histamine H4 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402430

Visão geral

HRH4 codifica o receptor de histamina H4 (H4R), um GPCR acoplado a Gi/o expresso predominantemente em compartimentos hematopoéticos e de células imunes, onde detecta a histamina para regular a quimiotaxia, a liberação de citocinas e a sinalização dependente de cálcio. A ativação do receptor suprime a atividade da adenilil ciclase, modula os níveis de AMPc e interage com redes de sinalização associadas a MAPK e PI3K que influenciam a migração de leucócitos e o grau de inflamação. A atividade de HRH4 contribui para o tráfego de células imunes e para a inflamação associada a barreiras, conectando a sinalização histaminérgica a processos alérgicos e inflamatórios. A desregulação da sinalização via H4R tem sido estudada em contextos como asma, dermatite, prurido e outras patologias imunomediadas, nas quais alterações dependentes do receptor nas respostas a quimiocinas e no recrutamento de leucócitos são frequentemente avaliadas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Histamine H4 Receptor (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HRH4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HRH4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HRH4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Histamine H4 Receptor.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HRH4 para a investigação da sinalização de Histamine H4 Receptor, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HRH4 críticos para a função Histamine H4 Receptor
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HRH4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Histamine H4 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Histamine H4 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HRH4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Histamine H4 Receptor Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Histamine H4 Receptor (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HRH4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HRH4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.