HIPK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406669

Visão geral

A proteína quinase 3 que interage com homeodomínio (HIPK3) é uma quinase de serina/treonina que integra sinais de estresse e de desenvolvimento ao fosforilar reguladores transcricionais, moldando assim programas de expressão gênica ligados a decisões de destino celular. A HIPK3 tem sido implicada na modulação da sinalização apoptótica, nas respostas a danos no DNA e nos desfechos transcricionais associados a TGF-β/BMP por meio de interações com proteínas homeobox e outros fatores nucleares. Por essas funções, a HIPK3 pode influenciar a proliferação, a diferenciação e a tolerância celular ao estresse, processos frequentemente perturbados na biologia do câncer e em contextos de remodelamento tecidual. A atividade ou expressão desregulada de HIPK3 também tem sido associada a alterações na sinalização inflamatória e na homeostase metabólica, sustentando sua utilidade como um nó mecanístico em estudos centrados em vias de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HIPK3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HIPK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HIPK3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HIPK3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HIPK3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HIPK3 para a investigação da sinalização de HIPK3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HIPK3 críticos para a função HIPK3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HIPK3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HIPK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HIPK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HIPK3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HIPK3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HIPK3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HIPK3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HIPK3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.