Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420883

概要

Hmox2 はヘムオキシゲナーゼ2（HO-2）をコードしており、恒常的に発現する小胞体関連酵素として、ヘムを分解してビリベルジン、遊離鉄、一酸化炭素を生成します。細胞内のヘム利用可能性の制御とレドックス活性代謝産物の産生を通じて、HO-2 は酸化ストレス応答、鉄恒常性、ならびに血管トーンや神経活動を調節し得る一酸化炭素（CO）依存性シグナル伝達に影響を及ぼします。マウス組織では Hmox2 は神経系で高く発現し、代謝適応、ヘム媒介性の細胞毒性からの防御、炎症シグナルのクロストークに寄与します。ヘム代謝回転の破綻や HO-2 活性の変化は、神経炎症、虚血ストレス、心肺生理のモデルにおいて関与が示唆されており、Hmox2 はヘム代謝およびストレスシグナル伝達を経路レベルで研究するための有用な標的です。

Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるHmox2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Hmox2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Hmox2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Heme Oxygenase 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Heme Oxygenase 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Hmox2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Heme Oxygenase 2の機能に不可欠なHmox2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Hmox2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびHeme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Hmox2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Heme Oxygenase 2 HDRプラスミド（m）および Heme Oxygenase 2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHmox2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHmox2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。