Hck Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401507-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HckO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Hck (h) e o Plasmídeo Double Nickase Hck (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HCK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Hck Anticorpo (G-4): sc-166463
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hck Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401507-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hck Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401507-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HCK codifica a Hck, uma tirosina quinase não receptora da família Src, enriquecida em linhagens hematopoéticas e mieloides, que conecta sinais de imunorreceptores e citocinas a vias de sinalização dependentes de fosforilação. A Hck participa de vias que controlam a ativação imune inata, a sinalização por receptores Fc, a adesão mediada por integrinas, a fagocitose e a remodelação do citoesqueleto, influenciando a migração celular e as respostas inflamatórias. Por meio de comunicação cruzada com redes associadas a PI3K/AKT, MAPK e NF-κB, a Hck ajuda a regular proliferação, sobrevivência e diferenciação em células imunes. A atividade ou expressão desregulada de HCK tem sido associada a sinalização mieloide aberrante e foi estudada em contextos que incluem a biologia da leucemia e a função de macrófagos associados a tumores em microambientes inflamatórios.
Hck O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HCK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HCK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HCK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HCK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.