HAO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405855

概要

HAO2（hydroxyacid oxidase 2）は、2-ヒドロキシ脂肪酸の酸化に関与するペルオキシソーム局在のFMN依存性オキシダーゼをコードし、脂質分解代謝およびペルオキシソームを介したレドックス恒常性の維持に寄与します。基質酸化の過程で過酸化水素を産生することから、HAO2はペルオキシソーム機能に関連する細胞の酸化ストレス制御や代謝適応経路とも交差します。HAO2の発現変動は肝臓生物学における代謝リプログラミングと関連づけられており、肝細胞癌の複数のトランスクリプトーム研究でも報告されていることから、腫瘍関連の代謝状態を調べるためのマーカーとしての有用性が示唆されています。したがって、HAO2の破壊または発現調節は、ヒト細胞モデルにおけるペルオキシソーム脂質代謝、活性酸素種（ROS）の処理、ならびにそれに伴う下流シグナルの影響を解析するために有用です。

HAO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHAO2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HAO2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HAO2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HAO2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HAO2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HAO2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HAO2の機能に不可欠なHAO2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HAO2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HAO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHAO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HAO2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HAO2 HDRプラスミド（h）および HAO2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHAO2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHAO2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。