H2BFWT CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407111

概要

H2BFWT は、ヌクレオソームの構築および高次クロマチン構造に関与するヒトのヒストン H2B ファミリーの一員をコードしており、転写・複製・DNA 修復に対するゲノムのアクセス性に影響を及ぼします。クロマチンの中核成分として、H2BFWT はエピジェネティック制御や、細胞周期の進行、ゲノム安定性の維持といったクロマチン依存的プロセスの協調に寄与します。ヒストン量やクロマチン組成の変化は、しばしば遺伝子発現プログラムの破綻と関連し、腫瘍化や発生異常に関与する経路を修飾し得ます。そのため H2BFWT は、ヒト細胞におけるクロマチンダイナミクス、転写制御、DNA 損傷応答の研究において重要な標的となります。

H2BFWT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるH2BFWT遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、H2BFWT内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、H2BFWTのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、H2BFWTタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、H2BFWTシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、H2BFWT欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• H2BFWTの機能に不可欠なH2BFWTエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、H2BFWTゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• H2BFWT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびH2BFWT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、H2BFWT遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  H2BFWT HDRプラスミド（h）および H2BFWT HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはH2BFWTホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のH2BFWT標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。