H2-Q1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420774

概要

H2-Q1は、マウスにおいて非古典的MHCクラスI（クラスIb）分子をコードし、細胞表面での抗原提示および免疫調節性シグナル伝達に寄与します。古典的なH-2分子と比べて、H2-Q1は特化したペプチド結合や、特定のT細胞サブセットおよびNK細胞受容体による認識と関連づけられることが多く、免疫監視や末梢免疫寛容に影響を及ぼします。その発現と機能は、リンパ球活性化、サイトカイン駆動性炎症、免疫介在性の組織恒常性を制御する経路と交差します。クラスI依存的な認識の破綻は、自己免疫、感染、腫瘍免疫などの文脈でしばしば研究されており、H2-Q1は免疫回避や免疫病理の機構を解明するための有用な遺伝子座となります。

H2-Q1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるH2-Q1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、H2-Q1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、H2-Q1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、H2-Q1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、H2-Q1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、H2-Q1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• H2-Q1の機能に不可欠なH2-Q1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、H2-Q1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• H2-Q1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびH2-Q1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、H2-Q1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  H2-Q1 HDRプラスミド（m）および H2-Q1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはH2-Q1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のH2-Q1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。