Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) h-prune: sc-412914-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)h-prune consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa h-prune (h) y el plásmido de doble nickasa h-prune (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PRUNE1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: h-prune Anticuerpo (F-5): sc-393318
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) h-prune | sc-412914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) h-prune | sc-412914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRUNE1 codifica h-prune, un miembro de la familia de fosfodiesterasas DHH implicado en el metabolismo de nucleótidos cíclicos y en la actividad fosfodiesterasa, con funciones adicionales en la regulación de la motilidad celular y la dinámica del citoesqueleto. h-prune se ha relacionado con redes de señalización que incluyen el recambio de adhesiones focales y vías asociadas a pequeñas GTPasas que coordinan fenotipos de migración e invasión en sistemas modelo. La alteración genética de PRUNE1 se asocia con trastornos del neurodesarrollo, lo que concuerda con funciones en el desarrollo neuronal y la homeostasis celular. En biología del cáncer, se ha estudiado la expresión alterada de PRUNE1 en el contexto de la progresión metastásica y de la reconfiguración de vías que sustentan programas proliferativos y migratorios.
h-prune El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PRUNE1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PRUNE1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PRUNE1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PRUNE1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.