GSDMDC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437380

概要

ラットGSDMDC1は、膜リモデリングおよび制御性細胞死プログラムに関与するとされるガスデルミン（gasdermin）ドメイン含有タンパク質をコードしており、これらの過程は自然免疫シグナル伝達や組織恒常性の形成に寄与します。ガスデルミンファミリーのメンバーは一般に炎症性プロテアーゼカスケードの下流に位置し、膜孔形成、イオンフラックス、炎症性メディエーターの放出に影響を与えることで、インフラマソームシグナルやストレス誘導性細胞傷害などの経路と交差します。GSDMDC1は典型的なガスデルミンと比べて解析が十分に進んでいないものの、そのドメイン構造から、上皮の完全性維持や損傷応答における役割が示唆されます。ガスデルミン関連経路の制御破綻は炎症性・変性性の表現型と関連づけられており、GSDMDC1は疾患関連のラットモデルにおける機構解明研究の有用な標的となります。

GSDMDC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GSDMDC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GSDMDC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GSDMDC1の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GSDMDC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびGSDMDC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GSDMDC1 HDRプラスミド（r）および GSDMDC1 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。