GRAMD1C CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-412329

개요

GRAMD1C(GRAM 도메인을 포함하는 1C)는 비소포성 스테롤 수송과 세포 내 콜레스테롤 항상성에 관여하는 소포체(ER) 고정형 지질 전달 단백질을 암호화합니다. GRAM 도메인 의존적 막 감지 기능과 지질이 풍부한 막과의 상호작용을 통해, GRAMD1C는 ER–세포소기관 접촉 부위(contact site) 생물학 및 막 지질 조성 조절과 연관됩니다. 이러한 과정은 미토콘드리아 기능, 자가포식/미토파지, 그리고 세포 에너지 대사를 조절하는 경로와 교차하므로, GRAMD1C는 지질에 의해 매개되는 소기관 간 크로스토크를 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다. 또한 GRAMD1C의 발현 또는 기능 변화는 대사적 표현형 및 암과 연관된 세포 상태의 맥락에서 탐구되어 왔으며, 질환 모델에서 지질 대사의 기전을 연구하는 데 그 관련성을 뒷받침합니다.

GRAMD1C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GRAMD1C 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GRAMD1C 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GRAMD1C의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GRAMD1C 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GRAMD1C 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GRAMD1C 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GRAMD1C 기능에 중요한 GRAMD1C 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GRAMD1C 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GRAMD1C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GRAMD1C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GRAMD1C 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GRAMD1C HDR 플라스미드 (h) 및 GRAMD1C HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GRAMD1C 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GRAMD1C 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.