Plasmide Double Nickase (m) GPR92: sc-436329-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GPR92 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR92 Double Nickase (m) et le plasmide GPR92 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lpar5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GPR92 | sc-436329-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) GPR92 | sc-436329-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lpar5 code le récepteur murin de l’acide lysophosphatidique GPR92, un RCPG de classe A qui convertit des signaux lipidiques extracellulaires en réponses intracellulaires de seconds messagers. Après activation, GPR92 peut recruter des protéines G hétérotrimériques pour réguler la production d’AMPc, la signalisation via la phospholipase C avec mobilisation de Ca²⁺, ainsi que l’activité en aval de la voie MAPK/ERK, influençant la migration cellulaire, la survie et les programmes d’expression génique inflammatoires. La signalisation LPA–GPR92 a été associée à la communication neuro-immune et aux réponses inflammatoires périphériques, et la dérégulation de la signalisation lipidique médiée par les RCPG est pertinente dans des modèles de douleur, d’activation immunitaire et de remodelage tissulaire. Ces caractéristiques font de Lpar5 une cible utile pour étudier la biologie des médiateurs lipidiques et les réseaux de signalisation dépendants des RCPG dans les systèmes murins.
GPR92 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lpar5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lpar5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lpar5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lpar5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.