Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) GPR84: sc-401953-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR84 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR84 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR84 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR84. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GPR84 Anticuerpo (1D9): sc-293447
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR84 | sc-401953-NIC | 20 µg | $410.00 |
GPR84 codifica un receptor acoplado a proteína G de tipo rodopsina que se activa por ácidos grasos de cadena media y se acopla predominantemente a la señalización Gi/o para modular el AMPc y programas inflamatorios posteriores. En células mieloides y otros tipos celulares con capacidad de respuesta inmunitaria, GPR84 influye en la quimiotaxis, la producción de citocinas y el crosstalk entre metabolismo e inflamación mediante vías que convergen en la regulación transcripcional dependiente de MAPK y NF-κB. La actividad alterada de GPR84 se ha asociado con respuestas inmunitarias innatas desreguladas y microambientes inflamatorios en múltiples contextos patológicos, lo que respalda su uso como una herramienta molecular para estudiar la señalización inmunometabólica. Como receptor de superficie que integra señales derivadas de lípidos, GPR84 también es relevante para dilucidar cómo la disponibilidad de nutrientes moldea el estado de las células inmunitarias y la remodelación tisular.
GPR84 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR84 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR84. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR84. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR84 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.