GPR78 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405837

概要

GPR78は、膜貫通型のシグナル伝達および細胞外からの刺激に対する細胞応答の協調に関与すると考えられるGタンパク質共役受容体（GPCR）をコードします。GPCRとしてのGPR78は、cAMPやカルシウムに連動したシグナル伝達を含む下流のセカンドメッセンジャー経路を調節し得る位置づけにあり、細胞増殖・生存・運動性といったプログラムに影響を及ぼす可能性があります。GPCRの発現やシグナル動態の変化は、組織恒常性の破綻やがん化過程と関連することが多く、GPR78はがん生物学および関連するシグナル表現型の機序解明研究において重要な標的となり得ます。さらに、GPR78の機能を特性解析することは、受容体活性を転写・代謝の適応へと結び付ける経路マッピングの取り組みにも寄与します。

GPR78 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPR78遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPR78内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPR78のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR78タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR78シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPR78欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR78の機能に不可欠なGPR78エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPR78ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR78 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR78 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPR78遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR78 HDRプラスミド（h）および GPR78 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPR78ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPR78標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。