GPR55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432690
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR55 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR55, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432690 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Gpr55** de camundongo codifica o **GPR55**, um receptor acoplado à proteína G órfão (GPCR) amplamente estudado na rede de sinalização relacionada ao sistema endocanabinoide e responsivo a mediadores lipídicos como o **lisofosfatidilinositol**. O GPR55 se acopla a **Gα12/13** e **Gαq** e às vias downstream **RhoA–ROCK** e **PLCβ–Ca2+**, influenciando a remodelação do citoesqueleto, a migração e programas transcricionais, incluindo a sinalização **MAPK/ERK**. Em contextos imunes e estromais, a atividade do GPR55 tem sido associada à modulação da sinalização inflamatória, ao equilíbrio **osteoclasto/osteoblasto** e à excitabilidade neuronal. A desregulação da sinalização associada ao GPR55 tem sido investigada em modelos de dor, fenótipos metabólicos, distúrbios ósseos e remodelamento tecidual associado à inflamação, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de vias de GPCR.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR55 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gpr55 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gpr55, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gpr55 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR55.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gpr55 para a investigação da sinalização de GPR55, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gpr55 críticos para a função GPR55
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gpr55 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GPR55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gpr55. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR55 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GPR55 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gpr55 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gpr55 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.