GPR19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407000

概要

GPR19は、主に細胞膜に局在するオーファンGタンパク質共役受容体（GPCR）をコードしており、三量体Gタンパク質と共役してセカンドメッセンジャーシグナル伝達および下流の転写プログラムに影響を与えると考えられています。内因性リガンドは依然として完全には同定されていないものの、GPR19の活性は細胞興奮性、代謝シグナル、ならびに文脈依存的な増殖・分化制御の調節と関連づけられています。GPR19に関連するGPCR介在性経路は、cAMP/PKA、MAPK/ERK、カルシウム依存性シグナル伝達と交差し得て、細胞状態の決定やストレス応答を形作ります。GPR19のようなオーファン受容体の発現異常を含むGPCRシグナル伝達環境の変化は、神経生物学、炎症、がん関連表現型にまたがる多因子疾患において検討されており、機序解明研究における重要性が示唆されています。

GPR19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPR19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPR19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPR19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPR19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR19の機能に不可欠なGPR19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPR19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPR19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR19 HDRプラスミド（h）および GPR19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPR19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPR19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。