GPR171 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412047

概要

GPR171は、抑制性シグナル伝達と主に共役し、細胞内cAMPおよびその下流の転写プログラムの調節に関与するとされる、オーファンのクラスA（ロドプシン様）Gタンパク質共役型受容体（GPCR）をコードします。免疫系および神経関連の文脈で発現しており、細胞内シグナル伝達のトーン、神経調節回路、ならびに炎症応答性の調節との関連が報告されています。神経ペプチドBigLENとの相互作用が報告されていることから、ペプチド介在性のGPCRシグナル伝達や、細胞の活性化状態をネットワークレベルで制御する役割が示唆されます。GPR171が関与するGPCRシグナルの変化は、神経行動表現型や免疫調節との関連で検討されており、受容体介在性のシグナル伝達を経路レベルで解析する研究において重要性が支持されています。

GPR171 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPR171遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPR171内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPR171のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR171タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR171シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPR171欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR171の機能に不可欠なGPR171エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPR171ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR171 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR171 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPR171遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR171 HDRプラスミド（h）および GPR171 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPR171ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPR171標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。