GPR126 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407085

概要

ADGRG6（GPR126）は接着型Gタンパク質共役受容体（adhesion GPCR）をコードしており、細胞外マトリックスおよび細胞間相互作用からのシグナルを統合して、cAMP/PKA依存性経路を含む三量体Gタンパク質を介したシグナル伝達を制御します。GPR126はシュワン細胞の発生と髄鞘形成の主要な制御因子であり、末梢神経の成熟に寄与します。さらに、軟骨の生物学、骨格成長、血管発生にも関与します。大きな細胞外ドメインとGPCRプロテオリシス部位での自己プロテオリシスを介して、GPR126は機械刺激応答や発生過程に関わるシグナル伝達プログラムに影響を及ぼします。ADGRG6の遺伝学的・機能的な攪乱は、神経発達および筋骨格系の表現型と関連づけられており、髄鞘形成、細胞分化、組織形態形成の研究における重要性を裏付けています。

GPR126 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADGRG6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADGRG6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADGRG6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR126タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR126シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADGRG6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR126の機能に不可欠なADGRG6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADGRG6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR126 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR126 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADGRG6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR126 HDRプラスミド（h）および GPR126 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADGRG6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADGRG6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。