Plasmide Double Nickase (h) GPR125: sc-408335-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR125 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR125 Double Nickase (h) et le plasmide GPR125 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADGRA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR125 | sc-408335-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GPR125 | sc-408335-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADGRA3 code pour le récepteur d’adhésion couplé aux protéines G GPR125, un récepteur membranaire multipasse impliqué dans les interactions cellule–cellule et cellule–matrice, ainsi que dans la modulation de la signalisation intracellulaire via des voies associées aux GPCR. En tant que GPCR d’adhésion, GPR125 est associé à la régulation de la polarité cellulaire, de la migration et des programmes de différenciation, avec des rôles rapportés dans la biologie des cellules épithéliales et des cellules souches/progénitrices. Une expression altérée d’ADGRA3/GPR125 a été étudiée dans le contexte de la biologie tumorale et du remodelage tissulaire, où des modifications de la signalisation liée à l’adhésion peuvent influencer le comportement invasif et les réponses au microenvironnement. Ces caractéristiques font d’ADGRA3 une cible utile pour disséquer les réseaux de signalisation dépendants de l’adhésion et les programmes transcriptionnels associés aux lignages dans des modèles cellulaires humains.
GPR125 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADGRA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADGRA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADGRA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADGRA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.