GPIHBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403473

概要

GPIHBP1（glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1）は、内皮細胞表面に存在するタンパク質で、リポタンパク質リパーゼ（LPL）を捕捉し、毛細血管腔へ輸送することで、トリグリセリドに富むリポタンパク質の血管内加水分解を可能にします。内皮においてLPLの処理軸を組織化することで、GPIHBP1は血漿トリグリセリド恒常性を制御する脂質取り込み・クリアランス経路の中核を担います。GPIHBP1機能の破綻は、重度の高トリグリセリド血症やカイロミクロン／VLDLの処理障害と関連し、本遺伝子が脂質異常症に関連する代謝表現型と結び付くことを示しています。そのためGPIHBP1は、血管生物学、リポタンパク質代謝、ならびに内皮による脂質カーゴの取り扱いを規定する機構の研究において広く検討されています。

GPIHBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPIHBP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPIHBP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPIHBP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPIHBP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPIHBP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPIHBP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPIHBP1の機能に不可欠なGPIHBP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPIHBP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPIHBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPIHBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPIHBP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPIHBP1 HDRプラスミド（h）および GPIHBP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPIHBP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPIHBP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。