非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
GP-39 抗体 (E-10): sc-393476. 未转染: sc-110760 (A) 和转染人 GP-39: sc-110933 (B) 293 全细胞裂解液和人肝组织提取物 (C) 中 GP-39 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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GP-39 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402147
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GP-39 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在GP-39基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GP-39: sc-393494，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GP-39 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402147 | 20 µg | $397.00 |
概述
CHI3L1 编码 GP-39（YKL-40），这是一种分泌型糖蛋白，属于几丁质酶样（chitinase-like）家族，虽缺乏酶活性，但可调控细胞外基质的组织结构、细胞黏附以及组织重塑。GP-39 可由多种细胞类型产生，包括巨噬细胞、中性粒细胞和成纤维样细胞，并与炎症信号传导及基质—免疫相互作用相关。它被认为参与血管生成和纤维化过程的调控，常用于研究慢性炎症与异常基质周转等情境。CHI3L1 表达失衡与多种疾病相关表型有关，包括癌相关基质、神经炎症，以及代谢性和气道炎症状态，因此是通路研究与生物标志物机制研究中的一个重要节点。
GP-39 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CHI3L1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CHI3L1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CHI3L1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使GP-39蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CHI3L1缺失的细胞模型，用于GP-39信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 GP-39 功能至关重要的 CHI3L1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CHI3L1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 GP-39 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 GP-39 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CHI3L1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 GP-39 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 GP-39 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CHI3L1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CHI3L1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。