glypican-4 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-420640-LAC-2

Das murine Gen Gpc4 kodiert Glypican-4, ein über Glycosylphosphatidylinositol (GPI) verankertes Heparansulfat-Proteoglykan, das an der Zelloberfläche und in der extrazellulären Matrix lokalisiert ist und dort die Verteilung von Morphogenen und Wachstumsfaktoren reguliert. Glypican-4 moduliert Signalwege wie Wnt/β-Catenin, FGF und BMP, indem es Ligand-Rezeptor-Interaktionen beeinflusst und Gradienten etabliert, die während der Entwicklung Proliferation, Differenzierung und Gewebemusterbildung steuern. Veränderungen der Gpc4-Aktivität oder -Expression werden mit einer fehlregulierten extrazellulären Signalübertragung in Verbindung gebracht und in Kontexten wie metabolischer Homöostase, Fettgewebsbiologie und neurodevelopmentalen Prozessen untersucht, was das Gen für Studien zur Genetik komplexer Merkmale relevant macht. Die Geneditierung von Gpc4 in Mausmodellen ermöglicht die mechanistische Aufklärung heparansulfatabhängiger Signalübertragung, der Zell-Zell-Kommunikation und der Regulation der extrazellulären Matrix über entwicklungs- und krankheitsassoziierte Phänotypen hinweg.

glypican-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Gpc4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

glypican-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Gpc4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen glypican-4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Gpc4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.