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GluR-4双切口酶质粒(h) | sc-403414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-4双切口酶质粒(h2) | sc-403414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIA4 编码 AMPA 型离子型谷氨酸受体的 GluR-4(GluA4)亚基,该受体介导中枢神经系统中的快速兴奋性神经传递。含 GluR-4 的受体通过配体门控的 Na⁺/K⁺ 电导及其下游与 Ca²⁺ 相关的信号级联,调控突触可塑性、活动依赖性的神经回路成熟以及神经元兴奋性。GRIA4 的功能与谷氨酸能突触的组织、受体转运以及依赖磷酸化的通道门控调节相互交叉。AMPA 受体组成或信号传导的失调与神经发育及神经精神相关表型有关,这表明 GRIA4 是研究兴奋性突触生物学机制的重要靶点。
GluR-4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GRIA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GRIA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GRIA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GRIA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。